Inmunología Clínica

Instalaciones:

Recepción de muestras. Área común con el resto de los laboratorios. Localizada en el laboratorio general (planta baja, edificio de investigación).

Toma de muestras. Área común con el resto de las extracciones de laboratorios. Localizada en la entreplanta.

Área de laboratorio de Inmunología: Localizado en planta -1, edificio de investigación y distribuido en 3 subáreas principales:

• Laboratorio de Diagnóstico Hematológico, Celular e Inmunodeficiencias (Mixto: Hematología + Inmunología).
• Laboratorio de Autoinmunidad e Inmunoalergia.
• Laboratorio de Bioquímica, Biología molecular y HLA y enfermedad.

Área de consultas externas: Localizada en la Planta 1 del hospital (consulta 6 de la zona de Hematología. Consulta de Inmunología clínica e Inmunodeficiencias en Adultos) y en la planta baja (Banco de Sangre. Consulta de Inmunología de la patología de la gestación). Cuenta con los siguientes recursos:

• 1 despacho para consultas compartido con el Servicio de Hematología.
• 1 sala de espera compartida con el Servicio de Hematología.
• 1 despacho para la Secretaría de Hematología /Oncología/Inmunología.
• 1 hospital de Día Oncohematológico. Uso compartido con otros Servicios.

El servicio no dispone de Unidad de Hospitalización, aunque sí tiene creada prestación para interconsulta de pacientes hospitalizados.

Técnicas y procedimientos

Laboratorio de Diagnóstico Hematológico, Celular e Inmunodeficiencias

El laboratorio de citometría de flujo de la Fundación Jiménez Díaz está enfocado al diagnóstico hematológico e inmunológico. Tiene un carácter multidisciplinar englobando a especialistas en Inmunología y Hematología.

Equipamiento

El laboratorio de citometría de flujo dispone de los siguientes citómetros de flujo (analizadores):

• Dos citómetros FACSCanto^TM II: disponen de tres láseres (láser violeta de 405nm, láser azul de estado sólido de 488nm y láser rojo de He-Ne de 633nm), que permiten la determinación de 8 parámetros simultáneamente, además de 2 parámetros de dispersión (FSC y SSC).
• Un citómetro AQUIOS^TM CL: automatizado y de carga continua. Dispone de un láser azul de estado sólido de 488nm, que permite trabajar con 4 fluorescencias simultáneamente, 2 parámetros de dispersión (FSC y SSC) y volumen electrónico (EV).
• CytoFlex: disponen de tres láseres (láser violeta de 405nm, láser azul de 488nm y láser rojo de 638nm), que permiten la determinación de 13 parámetros simultáneamente, además de 2 parámetros de dispersión (FSC y SSC).

Técnicas y procedimientos

La citometría de flujo es una tecnología objetiva, específica, sensible y rápida que permite el estudio multiparamétrico de las células. Cualquier muestra puede ser objeto de estudio siempre que finalmente se obtenga una suspensión celular. Para la preparación de las muestras se utilizan anticuerpos monoclonales marcados con fluorocromos. Éstos se unen de forma específica a las moléculas celulares, nucleares, citoplasmáticas y/o de superficie, que quieran ser estudiadas. Las células en suspensión son adquiridas individualmente en el citómetro de flujo, de tal forma que la luz láser emitida por el equipo incide sobre cada una de ellas generando:

• Dispersión de la luz láser: puede ser frontal o lateral y que informará sobre el tamaño y complejidad de la célula respectivamente.
• Excitación de los fluorocromos de los anticuerpos: los anticuerpos son específicos de determinadas moléculas. Si la molécula a estudio se encuentra en la célula, el anticuerpo la reconoce y por tanto la luz láser excita a su fluorocromo, quien a su vez libera fluorescencia. Si la molécula no está en la célula, no habrá de emisión de fluorescencia. Permite por tanto identificar si una molécula está presente o no y si está presente, en qué cuantía.
• Las señales luminosas son detectadas y transformadas por el sistema electrónico del citómetro, quien permite generar datos accesibles para que el citometrista pueda interpretarlos a través del correspondiente software de análisis (Infinicyt^TM).

Las principales aplicaciones que se llevan a cabo de esta técnica en el laboratorio de citometría de flujo de la Fundación Jiménez Díaz son las siguientes:

• Estudio inmunofenotípico de las células en sospecha de enfermedades hematológicas: linfomas, leucemias, mieloma múltiple, mielodisplasias, etc. Diagnóstico y enfermedad mínima residual.
• Diagnósticos de Hemoglobinuria Paroxística Nocturna.
• Determinación de hemoglobina fetal en sangre materna.
• Estudio de esferocitosis hereditaria.
• Estudio de antígenos plaquetarios.
• Determinación de células CD34 en el trasplante de progenitores hematopoyéticos.
• Estudio de reconstitución inmunológica post-trasplante.
• Estudio de viabilidad celular.
• Cuantificación de células B en la evaluación del seguimiento en terapias anti-CD20.
• Estudio de linfocitos intraepiteliales (LIEs) en pacientes con sospecha de celiaquía.
• Determinación de subpoblaciones linfocitarias en el seguimiento de pacientes VIH.
• Determinación de la capacidad oxidativa de los neutrófilos.
• Estudio de subpoblaciones linfocitarias bajo sospecha de inmunodeficiencias primarias.
• Cribaje inicial en el estudio del antígeno HLA-B27.

Laboratorio de Bioquímica, biología molecular y HLA y enfermedad

Equipamiento

El laboratorio cuenta con termocicladores y equipos de PCR a tiempo real, un equipo para tipaje HLA por SSO, tres equipos automatizados para inmunoelectroforesis, un equipo de inmunoelectroisoenfoque para bandas oligoclonales, un analizador por quimioluminiscencia y un equipo de inmunoensayo para confirmaciones de VIH y VHC.

Técnicas y procedimientos:

• Estudio de HLA para el diagnóstico de Enfermedad Celiaca HLA DQ2/DQ8.
• Determinación de Alelos asociados a Enfermedad HLA B57, HLA B51, HLA B27 y HLA DQ6.
• Determinación subclases de IgG e IgD y componentes monoclonales e identificación de crioglobulinas.
• Identificación de BandasOligoclonales en LCR para el diagnóstico de Esclerosis Múltiple.
• Determinación de KL6, para diagnóstico y seguimiento de Enfermedad pulmonar intersticial.
• Determinación en LCR de Biomarcadores de Enfermedad de Alzheimer
• Determinación de serología frente a Virus de Hepatitis (A, B y C), Rubeola, Citomegalovirus, Toxoplasma.
• Determinación de Carga Viral Hepatitis B y C.
• Identificación de Genotipos de Hepatitis C.
• Pruebas para el diagnóstico y seguimiento de pacientes VIH: determinación de anticuerpos frente a VIH1/2 y Antígeno P24 por ELISA de 4ª generación, carga viral, recuento de linfocitos T CD4 y estudio de mutaciones de resistencias a fármacos antirretrovirales.

Laboratorio de Autoinmunidad e Inmunoalergia

Equipamiento

El Laboratorio de Alergias cuenta con 2 equipos de procesamiento de muestras Phadia IC1000 (Thermo®). Estos equipos están configurados para el trabajo en laboratorios de alto rendimiento, ajustándose a la creciente demanda de determinaciones de alergia in vitro.

El Laboratorio de Autoinmunidad cuenta con una amplia variedad de equipos automatizados que permiten la determinación de autoanticuerpos utilizando distintas plataformas de inmunoanálisis: ELISAs, quimioluminiscencia, fluoroenzimoinmunoensayo, técnicas multiplex, inmunoensayo en tira.

Cuenta con 2 microscopios de fluorescencia, un sistema de lectura automática de portas y un Software que permite la trazabilidad total del paciente y la generación de una biblioteca de imágenes.

Además, para la gestión completa de los resultados, el servicio trabaja con un Sistema de Información de Laboratorio que permite la integración y la conectividad completa entre los analizadores de la sección.

Técnicas y procedimientos:

• Laboratorio de Alergias:

Amplio catálogo de pruebas orientadas al estudio de alergias in vitro. Se realizan técnicas de cribado, identificación específica de alérgenos y estudio de IgE específica a nivel molecular. Esto permite obtener una imagen detallada del perfil IgE del paciente, evaluando el riesgo a desarrollar eventos clínicos graves, explicar los síntomas debidos a la reactividad cruzada y conocer el potencial efecto de la Inmunoterapia.

• Laboratorio de Autoinmunidad:

La presencia de autoanticuerpos forma parte de los criterios de Clasificación en numerosas patologías Autoinmunes, siendo clave la determinación en su diagnóstico.

• Estudio de Enfermedades Autoinmunes órgano-específicas:
  • Enfermedad Tiroidea Autoinmune.
  • Gastritis Autoinmune.
  • Hepatitis Autoinmune.
  • Colangitis Biliar Primaria.
  • Enfermedad Inflamatoria Intestinal.
  • Diabetes Mellitus.
  • Nefropatías Autoinmunes.
  • Enfermedades Ampollosas Autoinmunes.
  • Síndromes Poliglandulares Autoinmunes.

• Estudio de Enfermedades Autoinmunes sistémicas:
• Artritis Reumatoide.
• Lupus Eritematoso Sistémico.
• Esclerosis Sistémica.
• Miopatías Inflamatorias (Polimiositis/Dermatomiositis/Miopatía por Cuerpos de Inclusión).
• Enfermedad Mixta del Tejido Conectivo/ Síndromes de Solapamiento.
• Síndrome Anti-Fosfolípido.
• Vasculitis ANCA positivas.
• Enfermedad Celiaca.
• Monitorización de Fármacos Biológicos: Infliximab, Adalimumab.
• Determinación de Interleuquina 6.